结合流行病学情况，可以临床诊断(尽快得出临床初步诊断，并立即给予抗毒素治疗，任何延迟治疗会对病人有严重危害，尤其是婴幼儿)，确诊须以细菌培养及毒力试验为准。病灶直接涂片检查病原菌不可靠。白喉是一种严重的疾病，其致死率为5%~10%，并在小于5岁的儿童和大于40岁的成年人中可达到20%之高。人类是白喉棒状杆菌唯一天然宿主，主要是借着飞沫传染。
一、检查方法
1、血象白细胞增多，一般为(10～20)×109/L，中性粒细胞比例增加。重者可出现中毒颗粒。
2、细菌学检查在假膜与黏膜交界处涂抹，进行涂片检查和培养(吕氏培养基)，常可找到革兰阳性杆菌或白喉杆菌。必要时可作白喉杆菌毒力试验。
3、血清学检查采用荧光抗体法，在荧光显微镜下检测白喉杆菌，可早期诊断。
4、化验：用2%亚碲酸钾溶液涂抹在伪膜上，20分钟后伪膜变为黑色或深灰色为阳性，提示棒状杆菌感染。
5、细菌培养：取伪膜周缘分泌物作涂片和培养，检查白喉杆菌。
6、免疫学检查：白喉杆菌毒素试验及毒力试验均呈阳性者应视为白喉病人，毒力阴性者为带毒者。二者均阴性则可否定本病。
7、其他检查心电图有助于发现中毒性心肌炎，尿素氮、肌酸酐、肝功能在肝、肾损伤时，出现变化。
二、区分鉴别
(一)咽白喉需和下列疾病鉴别
1、急性扁桃体炎腭扁桃体的一种非特异性急性炎症，常伴有一定程度的咽粘膜及咽淋巴组织的急性炎症。中医称为“乳蛾”、“喉蛾”或“莲房蛾”。常发生于儿童及青少年。起病急，热度高，扁桃体红肿，咽痛明显;分泌物较薄，色较淡，仅限于扁桃体，拭之容易剥落。
2、溃疡膜性咽炎咽部有坏死性溃疡和假膜，常伴齿龈炎，易出血，口腔有恶臭。咽拭子涂片可找到梭形杆菌和螺旋体。
3、鹅口疮又名雪口病白念菌病(moniliasis)，鹅口、雪口、鹅口疳、鹅口白疮。是由真菌传染，在粘膜表面形成白色斑膜的疾病多见于婴幼儿。本病是白色念珠菌感染所引起。这种真菌有时也可在口腔中找到当婴儿营养不良或身体衰弱时可以发病。
4、传染性单核细胞增多症扁桃体上有白膜，消退慢。涂片和培养无白喉杆菌，白喉抗毒素治疗无效。周围血液中有异常淋巴细胞，血嗜异性凝集试验可呈阳性，特异抗全阳性。
(二)鼻白喉需和下列疾病鉴别
1、慢性鼻炎是鼻腔粘膜和粘膜下层的慢性炎症。表现为鼻粘膜的慢性充血肿胀，称慢性单纯性鼻炎(chronicsimplerhinitis)。若发展为鼻粘膜和鼻甲骨的增生肥厚，称慢性肥厚性鼻炎(chronichypertrophicrhinitis)。
2、鼻腔内异物常为一侧性，检查时可发现鼻腔内有异物而无假膜。
3、先天性梅毒又称胎传梅毒(prenatalsyphilis)，病原体在母体内通过胎盘途径感染胎儿，可引起死产、早产，妊娠梅毒对胎儿的有害风险较正常孕妇高2.5倍妊娠合并梅毒其围产儿病死率高达50%。是一种严重影响婴幼儿身心健康的疾病。梅毒发病率持续增高，胎传梅毒逐年攀升必须引起高度重视。常伴有其他梅毒症状，鼻腔内有溃疡而无白膜。血清华康氏反应阳性。
(三)喉白喉需和下列疾病鉴别
1、气管内异物有异物吸入史，当异物吸入时有剧烈咳嗽，以后咳嗽呈阵发性。无假膜发现，胸透时常可见局限性肺气肿或肺不张。
2、急性喉炎儿童期的急性喉梗阻大多由于急性喉炎、麻疹并发喉炎和喉白喉所引起。由于原发性喉炎患者的咽部无假膜，故出现喉梗阻时不易确认;麻疹并发喉炎者有麻疹史;急性喉炎起病急，突然呼吸困难。如有白膜自气管切口处喷出，则应考虑白喉的诊断。